Trong vũ trụ Earth-65, hay còn được biết đến là quê hương của Spider-Gwen, bối cảnh phản diện mang đến một sự biến tấu thú vị so với các nhân vật quen thuộc của Marvel. Trong khi một số kẻ thù phản ánh các đối tác ở Vũ trụ Marvel chính, một số lượng đáng kể là những phản chiếu méo mó, đen tối của các anh hùng biểu tượng, tất cả đều tồn tại trong một thực tại bị định hình sâu sắc bởi sự vắng bóng của Peter Parker Earth 65. Mặc dù bản thân Peter Parker không phải là một nhân vật phản diện trong thế giới này, nhưng số phận bi thảm của anh ta đã phủ một cái bóng dài, ảnh hưởng đến nguồn gốc và động cơ của nhiều người đối đầu với Spider-Gwen.
Một ví dụ nổi bật là Matt Murdock. Trong Vũ trụ Marvel chính, Matt Murdock là Daredevil anh hùng. Tuy nhiên, Matt Murdock của Earth-65 đã tận dụng các giác quan nhạy bén và kỹ năng võ thuật của mình để trở thành một thế lực tàn nhẫn của cái ác. Anh ta vươn lên qua các cấp bậc của thế giới ngầm tội phạm, cuối cùng chiếm đoạt vị trí của Wilson Fisk để trở thành Kingpin. Murdock phát triển một nỗi ám ảnh đặc biệt với Gwen Stacy, tìm cách làm tha hóa cô, thêm một chiều hướng cá nhân và độc ác vào sự phản diện của mình. Sự tha hóa này tương phản rõ rệt với quỹ đạo anh hùng của Daredevil trong vũ trụ chính, làm nổi bật những con đường khác nhau mà các cá nhân có thể đi trong sự vắng bóng của những nhân vật chủ chốt như Peter Parker Earth 65, người mà trong các thực tế khác, có thể đã truyền cảm hứng cho chủ nghĩa anh hùng.
Tương tự, đối tác Frank Castle của Earth-65 đã rẽ sang hướng phản diện. Thay vì trở thành Punisher, Đại úy Frank Castle của NYPD đã bị thúc đẩy bởi sự truy đuổi không ngừng Spider-Woman sau khi Đại úy Stacy bị loại khỏi vụ án. Các phương pháp bạo lực quá mức của anh ta, bao gồm cả việc thuê lính đánh thuê như Kraven the Hunter, đã đẩy anh ta vượt ra ngoài ranh giới của pháp luật, biến anh ta thành một kẻ chạy trốn. Cách tiếp cận hung hăng và bất hợp pháp này, khác xa với công lý cảnh giác của Punisher trong vũ trụ chính, nhấn mạnh cách sự vắng bóng của một nhân vật la bàn đạo đức như Peter Parker Earth 65 có thể dẫn đến những kết quả đen tối hơn cho những người có nhiệm vụ duy trì công lý.
Ngay cả những nhân vật từ thần thoại Fantastic Four cũng bị bóp méo thành nhân vật phản diện ở Earth-65. Sue và Johnny Storm, được biết đến là những nhà thám hiểm trẻ tuổi trong chương trình TV Fantastic Four của thế giới họ, đã rơi vào tầm ảnh hưởng của Doctor Doom. Họ đã cố gắng giành quyền kiểm soát New York, thể hiện khát khao quyền lực khác biệt hoàn toàn so với các đối tác anh hùng của họ. Sue Storm thậm chí đã phế truất Doctor Doom trong một thời gian ngắn, thể hiện mức độ tham vọng và sự phản diện hiếm thấy ở Invisible Woman của vũ trụ chính. Vụ chiếm đoạt quyền lực này minh họa cách các lý tưởng anh hùng thường gắn liền với những nhân vật như Peter Parker Earth 65 trong các thực tế khác vắng bóng, cho phép sự tham vọng không kiểm soát phát triển mạnh mẽ ở những người khác.
Cindy Moon, trong Vũ trụ Marvel chính, là anh hùng Silk, được trao sức mạnh bởi vết cắn của nhện. Ở Earth-65, Cindy Moon suýt chút nữa đã tránh được số phận này, dẫn đến một nỗi ám ảnh về những gì có thể đã xảy ra. Nỗi ám ảnh này đã thúc đẩy cô thao túng các sự kiện, đỉnh điểm là vết cắn của nhện đã ban cho Gwen Stacy sức mạnh của mình. Moon tiếp tục củng cố sự phản diện của mình bằng cách thành lập S.I.L.K., một tổ chức tội phạm chuyên thu thập các hiện vật Đa vũ trụ và phát động các cuộc tấn công chống lại Spider-Woman. Hành động của cô, được thúc đẩy bởi cảm giác về định mệnh bị bỏ lỡ, hoàn toàn trái ngược với những nỗ lực anh hùng của Silk, tiết lộ cách sự vắng bóng của một sự kiện tích cực, mang tính biến đổi như vết cắn của nhện mà Peter Parker Earth 65 đã trải qua có thể dẫn đến sự cay đắng và sự phản diện.
Sự ra đời của Venom trên Earth-65 cũng gắn liền với những hoàn cảnh thay đổi của thực tế này. Tiến sĩ Elsa Brock đã phát triển cộng sinh Venom bằng cách sử dụng đồng vị nhện có nguồn gốc từ máu của Jesse Drew và công thức Lizard. Khi Harry Osborn, tìm cách trả thù cho cái chết của Peter Parker, cố gắng sử dụng công thức Lizard, Gwen vô tình tiêm cho anh ta các đồng vị, giải phóng Venom. Chuỗi sự kiện bi thảm này, bắt nguồn từ nỗi đau buồn về cái chết của Peter Parker Earth 65, đã dẫn đến sự xuất hiện của một trong những đối thủ đáng gờm nhất của Spider-Gwen. Ngay cả sự biến đổi ngắn ngủi của Em Jay Watson thành Carnage do ảnh hưởng của Knull càng nhấn mạnh thế giới hỗn loạn và nguy hiểm được định hình bởi sự vắng bóng và ký ức về Peter Parker.
Tóm lại, những kẻ phản diện của Earth-65 không chỉ đơn thuần là những đối tác độc ác; họ thường là sản phẩm của một thế giới bị ảnh hưởng sâu sắc bởi sự vắng bóng của Peter Parker Earth 65. Cái chết của anh ta và những hiệu ứng lan tỏa mà nó gây ra đã tạo ra một thực tế nơi những anh hùng quen thuộc có thể trở thành những kẻ phản diện méo mó, và nơi cuộc chiến vì công lý là một cuộc đấu tranh đen tối và phức tạp hơn nhiều đối với Spider-Gwen.